Бласттрансформационен тест (LTT) за установяване на Т клетъчен имунен отговор към SARS-CoV-2

Изследвания

Важно:Бихме искали да знаете, че според настоящите наредби имунологичните находки като антитела срещу SARS-CoV-2 или специфичен за SARS Т-клетъчен отговор, не представляват право на „доказателство за имунитет“ пред официални органи (напр. гранична полиция, пътуване със самолет и т.н.).

Бласттрансформационен тест (LTT) за установяване на Т клетъчен имунен отговор към SARS-CoV-2

Досега рутинната лабораторна диагностика за установяване на имунитет след инфекция с новия коронавирус използва определянето на антителата към вируса SARS-CoV-2. Антителата могат да предотвратят инфекцията или да „подпомогнат“ елиминирането на патогени чрез неутрализиращи ефекти. Въпреки това, не всички пациенти развиват измеримо количество антитела след контакт с вируса, особено ако са били асимптоматични или при тях инфекцията  протекла много леко (Mallapaty, 2020; Long et al., 2020). 

В допълнение, научните данни показват, че отговорът на антителата след инфекция е краткотраен само в повечето случаи; подобно на SARS-CoV-1 през епидемията от 2003 г. Т-клетъчният отговор, от друга страна, играе централна роля в защитата срещу вируса, а Т-клетъчната памет може да продължи няколко години, 

Възможното откриване на специфични за SARS-CoV-2 Т клетки представлява значително обогатяване на лабораторната диагностика на COVID-19. Бласттрансформационният тест (LTT) за SARS-CoV-2 е методически и клинично валидиран тест в Лаборатория IMD Берлин. Пациентските клетки се стимулират със специфични пептиди, смеси от малки фрагменти от имунодоминантния шипчест гликопротеин на вируса (S протеин). При LTT SARS-CoV-2 се използват пептидни смеси от 2 области. Те обхващат така наречения С-терминален регион (С-край) и N-терминален регион (N-край) на целия S протеин (Фиг. 1).

peptidmix

Фиг. 1. Стимулирането на Т лимфоцитите на пациента се извършва с „пептидна библиотека“ от 158 припокриващи се пептиди от N-терминалния регион или 157 пептида от С-терминалната област.

Специфика на LTT-SARS-CoV-2

Смята се, че N-терминален регион е много специфичен за SARS-CoV-2, докато С-терминалният регион има по-високи хомологии с други бета-коронавируси (Braun et al, 2020). Нашите резултати показват, че при контролна група лица (без прекарана инфекция, без наличие на антитела) не показват реакции към N-терминалния пептид. За разлика от това, около 20-30% от пациентите показват умерена реакция към зоната на С-термина. Изолирана реакция към С-терминалния участък може да е свързана с кръстосана реактивност към други бета коронавируси. Дали и какво влияние може да има такава кръстосана реакция върху хода на инфекция със SARS-CoV-2, все още е предмет на изследване.

ltt covid

Фиг. 2. Представяне на пептиди към Т клетките и последващо активиране. Най-важният сигнал за активирането на Т клетката е специфичното разпознаване на пептида от Т-клетъчния рецептор (TCR). Пептидът трябва да „пасне“ точно, така както ключ-ключалка. За пълно активиране Т клетката също се нуждае от допълнителни сигнали от антиген-представящата клетка. Този сигнал се осигурява in vitro чрез прилагане на анти-CD28 антитела.

Чувствителност на LTT-SARS-CoV-2

Всички лица, които са с доказана SARS-CoV-2 инфекция (PCR позитивни), изследвани в нашите проучвания, показват ясна реактивност както към N-, така и към C-пептидите. Дори 5 месеца след заразяването, изследването LTT все още е било позитивно за SARS-CoV-2.

На кои въпроси може да даде отговор изследването LTT ​​SARS-CoV-2?

Имало ли е инфекция в миналото?
Тази индикация е важна при всички пациенти с несигурен (съмнителен) или предимно отсъстващ имунен отговор с антитела.

Пациенти, които са били PCR положителни, но нямат антитела, имат ли Т – клетъчен отговор срещу вируса?

Предполага се, че Т-клетъчният имунитет е свързан със силна имунна защита, дори при липса на откриване на антитела.

Около 10% от пациентите със симптоми и 40% от асимптоматичните пациенти губят своите IgG антитела във времето, така че предишна инфекция може да бъде доказана само чрез наличие на Т клетъчен отговор.

Откриваем ли е Т-клетъчен отговор към С-терминалните пептиди при неинфектирани преди това пациенти (ако няма отговор към силно специфичния N-терминален регион)?
Констелация от умерен имунен Т клетъчен отговор и наличие на Т-клетъчна памет само към С-крайната област на шипчестия протеин, но не и към SARS-CoV-2-специфичната N-терминална област. Според настоящите проучвания тази констелация от констатации се среща при приблизително 30% от неинфектираните, тъй като С-терминалната област има по-висока хомология с последователносттите на ендемичните циркулиращи коронавируси. Такава констатация говори за липса на инфекция със SARS-CoV-2, но показва кръстосана реактивност и по този начин възможен „частичен имунитет“. Такава кръстосана реактивност може да има към няколко ендемични циркулиращи коронавируси на „настинката“ (229E, OC43, NL63 и HUK1). Съществува хипотеза, че тази кръстосана реактивност може също да медиира поне частичен имунитет срещу SARS-CoV-2. Това би било възможно обяснение за факта, че някои лица не се разболяват следмконтакт или прекарват заболяването само с леки симптоми. За окончателна констатация по този въпрос обаче трябва да се изчакат допълнителни текущи проучвания.

Материал за изследването

20 ml кръв в епруветки с хепарин и 5 ml кръв за серум в епруветка без антикоагулант.

Пробите се изпращат в IMD в рамките на 24 ч. Кръвта се съхранява и транспортира при стайна температура.

ВАЖНО ЗА ВСИЧКИ LTT ТЕСТОВЕ

Кръв за изследането се взима само в четвъртък по следния график:

Харманли, Хасково и Димитровград – до 10:00 часа

Чирпан – до 12:00 часа

Стара Загора – до 11:00 часа

Пловдив-до 12:00 часа

София – до 13:30 часа

Препоръчително е да не са използвани кортикостероидни лекарства (напр. кортизон), цитостатични лекарства, имуносупресори 10 дни преди взимането на кръвните проби.

354,00 лв.Добави в количката

ИзследванеЦенаВреме за резултати (дни)КодПоръчай

Източници:

  • Long, Q.X., Tang, X.J., Shi, Q.L., Li, Q., Deng, H.J., Yuan, J., Hu, J.L., Xu, W. Zhang, Y., Lv, F.J., et al. (2020). Clinical and immunological assess-  ment of asymptomatic SARS-CoV-2 infections. Nat Med.
  • Mallapaty, S. (2020). Will antibody tests for the coronavirus really change everything? Nature 580, 571-572.
  • Channappanavar, R., Fett, C., Zhao, J., Meyerholz, D.K., and Perlman, S. (2014). Virus-specific memory CD8 T cells provide substantial protection from lethal severe acute respiratory syndrome coronavirus infection. J Virol 88, 11034-11044.
  • Braun, J., Loyal, L., Frentsch, M., Wendisch, D., Georg, P., Kurth, F., Hippen- stiel, S., Dingeldey, M., Kruse, B., Fauchere, F., et al. (2020).  SARS-CoV-2-reactive T cells in healthy donors and patients with CO VID-19. Nature.
3.4/5 (44 Reviews)

Всички наши медицински лаборатории:

Лаборатория Пловдив Гербера

Лаборатория Пловдив – Гербера

Лабораторията Пловдив - Тримонциум

Лаборатория Пловдив – МБАЛ Тримонциум

Лаборатория София

Лаборатория София – бул. България

Лаборатория София – МБАЛ Сердика

Лаборатория София – МБАЛ Сердика

IMG 02fc71955900dda873fab76132a70b33 V

Лаборатория Стара Загора

20210319 103500 1024x768 1

Манипулационна – Дружба

Лаборатория Асеновград

Манипулационна Асеновград

Манипулационна Димитровград 2

Манипулационна Димитровград

манипулационна пловдив васил априлов

Манипулационна Пловдив – ВМИ Васил Априлов

Манипулационан Смирненски

Манипулационна Пловдив – Смирненски

Синево Софиа Добрила

Манипулационна Пловдив – Тракия

Лабораторията Пловдив - Георги Котов

Манипулационна Пловдив – Георги Котов

Лаборатория Synevo Пловдив

Манипулационна Пловдив – Кючук Париж

лаборатория пловдив

Манипулационна Пловдив – очна болница Луксор

Манипулационна Пловдив – Рилон център

Манипулационна Пловдив – Рилон център

Синево Софиа Добрила

Манипулационна София – Добрила

DSCF1787

Манипулационна София – Овча Купел

Манипулационна София – Ангел Кънчев

Манипулационна София – Ангел Кънчев

Манипулационна София – ИСУЛ

Манипулационна Люлин 4

Манипулационна София – Люлин

Манипулационна София – Младост

Манипулационна София – Младост

Лаборатория София – Надежда

Манипулационна София – Надежда

Synevo в България

Манипулационна София – Оскар Клиник (бул. Черни връх)

Synevo logo FB post img

Манипулационна Стара Загора – Гурко

Synevo Лаборатории България

Манипулационна Стара Загора – Медицински Център Сано

Synevo Лаборатории България

Манипулационна Харманли

Лаборатория Хасково

Манипулационна Хасково

лаборатория цариградско шосе

Манипулационна Цариградско (до The Mall)

Synevo Лаборатории България

Манипулационна Чирпан

Партньорска лаборатория – Ескулап – София

Партньорска лаборатория – Здраве 99 – Русе

Партньорска лаборатория – Статус – Варна

Партньорска лаборатория – Унидиамед – Благоевград